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实用干货 | 酵母细胞如何有效计数?

更新时间:2023-10-26浏览:1278次

酵母细胞,也称酵母菌,在完成酵母细胞的制备后,科研人员需对酵母细胞的数量、死活、大小等进行测定,观测酵母细胞的生长状态。

目前酵母细胞可应用于食品工业、医药研究等领域,其中毕赤酵母细胞表达体系是目前已知酵母体系中表现ZuiHao的蛋白表达体系之一,可被用于纳米抗体等医药疫苗方面。

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亚甲基蓝染色法+人工显微镜计数(传统方法)

传统对酵母细胞的计数是以《国标:GB/T20886-2007,食品加工用酵母》为计数规则,使用亚甲基蓝染色的方法,通过高倍数的显微镜和血细胞计数板-对酵母细胞进行人工观测计数。

缺点.jpg

但亚甲基蓝染料存在部分酵母细胞无法正常染色、染色时间长,且人工计数存在操作过程繁琐、计数不准确、数据无法追溯等缺陷。



荧光酵母细胞计数仪+AOPI荧光染料 (新方法)

荧光酵母细胞计数仪,利用AOPI双色荧光染色的方法,更加准确地得出酵母细胞的数量和活率,相比于人工显微镜计数操作更便捷、计数时间更短、数据可追溯等。

前期准备示意图.jpg

前期准备荧光酵母细胞计数仪-细胞计数片-酵母细胞样品-AOPI荧光染料-移液器


操作流程

1-用移液器,按11比例取酵母细胞样品和AOPI荧光染料

2-用移液器反复吹打几次,混匀后,取10uL细胞样品,加样至细胞计数片

3-上样后,选择相对应的细胞样品类型

4-点击“开始计数"——“查看数据"即可(全程自动化操作,可实时观察细胞图像)


仪器介绍

JSY-FL-052型荧光酵母细胞计数仪,高倍放大光学系统,双色荧光通道,对直径≥1um的酵母细胞进行精准计数分析。

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仪器实拍细胞图

1-酿酒酵母细胞(识别图)





2-毕赤酵母细胞(识别图)



详情数据

计数结果包括总细胞浓度、活/死细胞浓度、活/死细胞比率、总细胞聚团率/浓度、活细胞聚团率/浓度、死细胞聚团率/浓度、活/死细胞直径等计数结果、原始图片、识别图片、报告单等


 

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