您的位置: 首页 > 技术文章 > 全自动细胞计数仪的计数方法及其应用分析

全自动细胞计数仪的计数方法及其应用分析

更新时间:2022-11-22浏览:742次

  全自动细胞计数仪的计数方法:
 
  (1)台盼蓝染色法
 
  台盼蓝染色是分别计数死亡细胞和活细胞的方法之一。染色的原理是台盼蓝无法穿透活细胞的完整细胞膜,因此活细胞不被染色;然而,死亡细胞的细胞膜被破坏,染料通过细胞膜在细胞中富集,使细胞变蓝。然而,台盼蓝染色可能无法准确区分有核细胞和细胞碎片,因此它倾向于低估细胞总数并高估细胞生存能力。
 
  (2)荧光细胞计数法
 
  吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色原理:活细胞通过AO染色发出绿色荧光,而死细胞通过PI染色发出红色荧光。重要的是,对于具有复杂背景的细胞,例如外周血单核细胞,具有更多细胞片段或簇的细胞数量可以避免检测到细胞片段。这种方法最近也被应用于单细胞基因组学,其中绿色对应于完整的细胞,红色对应于成功分离的细胞核。该策略允许研究人员计算未裂解的剩余细胞在细胞总数中的百分比,并计数细胞核以指示样品质量,帮助研究人员确定是否继续单细胞基因组学过程。
 
  全自动细胞计数仪在单细胞测序中的应用如下:
 
  单细胞基因组学技术目前正在全面应用,如单细胞RNA测序(scRNA-seq)和染色质转座酶可及性测序(ATAC-seq)。与对大量细胞进行测序的传统方法相比,单细胞基因组学技术突出了细胞之间的差异,这有助于更深入地了解样本材料。例如,scRNA-seq可以比较健康和患病状态的转录谱,而ATAC-seq可以解释染色质的可及性及其对基因表达的影响。
 
  然而,这些研究都需要对分离的细胞核进行精确计数,因为文库制备需要少量未裂解的细胞,并且样品中没有细胞团块和碎片。此外,许多单细胞基因组学技术需要完整的细胞核才能正常工作。
 

 

联系我们
  • QQ:
  • 邮箱:18124609201@163.com
  • 传真:020-31609340
  • 地址:广州市黄埔区中汭-钜富产业港A栋17楼

扫一扫  微信咨询

©2024 广州博大博聚科技有限公司 版权所有    备案号:粤ICP备13079967号    技术支持:18126702774    Sitemap.xml    总访问量:90073    博大博聚