1、清洁样品表面
(1)对于每种细胞计数方法,样品表面必须清洁。
(2)任何污染都可能导致不准确的结果。
(3)对于人工细胞计数,这包括移除并清洁玻璃盖,然后用70%乙醇和水清洁计数室。
(4)当使用一次性塑料载玻片时,每个样品都需要一个新的载玻片(如果载玻片有两个单独的腔室,则需要一对样品)。
2、加载样品前需要涡流振荡
(1)涡流振荡处理是在加载样品之前确保分析样品的代表性的重要步骤。
(2)不同大小和类型的细胞将以不同的速率沉降和聚集。在加载样品之前立即旋转溶液将增加均分的概率,并准确反映细胞培养的特征。
3、降低细胞聚集率
(1)细胞计数需要分析整个细胞悬浮液中的少量样品,因此必须小心确保样品代表原始的整个单细胞悬浮液。联川生物采用台盼蓝计数法、荧光计数计数星法、最原始的血细胞计数板法等方法监测和计算细胞活性。
(2)手动计数时,与单个细胞相比,细胞聚集率/聚集率的评分更主观,从而增加了变异性。细胞裂解后从细胞中释放的DNA(会导致粘稠的团块)和细胞碎片是导致团块的常见原因。
4、细胞计数参数调整
大多数自动细胞计数器可以调整各种设置参数,以最佳匹配正在研究的细胞。
例如,可以设置和保存细胞大小范围,以从分析中排除片段或其他细胞群。Countstar和其他计数器可以使用PBMC、Vero和其他单元格作为标准参考。