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全自动荧光细胞分析仪主要应用在哪些方面

发布时间:2022-04-01浏览:59次

 
  全自动荧光细胞分析仪是一款基于图像法检测,配合多荧光通道,通过采集图像中的细胞信息,进行定量分析。它将荧光显微成像与统计学群体分析结合于一身,既能提供细胞群的统计数据,又可以获得单个细胞的图像,从而提供细胞形态学信息。独特的图像采集系统同时产生明场以及四张荧光图像,让实验结果更为直观。
 

 

  全自动荧光细胞分析仪的应用举例:
 
  (一).在脂肪干细胞研究中的应用
 
  1.细胞浓度、活率计数
 
  全自动荧光细胞分析仪可同时进行台盼蓝及AOPI两种方法计数,确保不同状态的脂肪干细胞计数结果准确性。对于状态差的样本,台盼蓝计数的细胞图片中,出现许多台盼蓝染色非常浅的类似空泡状的细胞,这些细胞对样本死活的判断常常会比较主观、容易误判。
 
  AOPI方法可以很好解决这个问题。所以建议对于不同状态的的样本可根据需求采用两种方法计数结果正准确。
 
  2.脂肪干细胞细胞表型鉴定
 
  细胞密度、生长代数10代以内生物学特性基本保持不变,3代以上细胞表型标志物表达量下降,所以脂肪干细胞表型鉴定是非常重要的。主要包括细胞形态及CD分子标志物的鉴定。
 
  对于脂肪干细胞表型鉴定,全自动荧光细胞分析仪不仅可以为大家提供清晰可靠的细胞图片,同时可以结合FCSexpress类流式分析软件得到可靠的类流式数据分析,从而满足大家的需求。
 
  (二).在免疫治疗领域的应用
 
  免疫疗法,如CAR-T治疗包括从病人收集外周血单核细胞(PBMC),然后分离所需的T细胞亚群,通过基因改造产生工程CAR-T细胞,CAR-T细胞在体外大规模扩增后再回输到患者。全自动荧光细胞分析仪系统可以对整个CAR-T生产过程中细胞浓度,活率进行监测,并且符合GMP的要求。
 
  1.AO/PI双荧光法检测活率:
 
  吖啶橙和碘化丙啶是可以和细胞核核酸结合的荧光染料。AO可以穿透活细胞和死细胞对细胞核进行染色并发出绿色荧光,PI进入死细胞对细胞和进行染色并发出红色荧光。
 
  因此AO/PI为细胞核染料,可以准确区分活细胞与死细胞,而且可以排除杂质或者非特异细胞的干扰,进行精准的浓度活率检测。
 
  2.细胞毒性检测
 
  对靶标细胞用无毒的无放射性的钙黄绿素进行标记(或者GFP转染标记),我们可以观察CAR-T细胞对肿瘤细胞杀伤效应。活的肿瘤细胞会含有钙黄绿素或者GFP,死的肿瘤细胞不含有钙黄绿素或者GFP。
 
  Hoechst33342被用来染色所有的细胞(包含T细胞和肿瘤细胞),PI用来染色所有的死细胞(包含T细胞和肿瘤细胞)。这种染色策略可以让我们对细胞进行精准的区分。
 

 

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