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分享一份专业人员总结的细胞计数片的使用说明

发布时间:2021-08-12浏览:527次


    细胞计数片是一种常用的细胞计数工具,医学上常用来计数红细胞、白细胞等而得名,也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量,是一种常见的生物学工具。

 

    细胞计数片的使用说明:

    (1)充分混匀细胞,将细胞悬液滴加在两个细胞入口处。

    (2)放在显微镜下静置1-2分钟等待细胞附着在计数板上。

    (3)按照A→B→C→D的顺序对每个细胞计数室的细胞进行计数后加和。

    (关于网格线上的计数规则清参照下图以及注释(2))

    (3)细胞密度(CellDensity)通过以下公式计算得到,N是四个细胞计数室的

    (4)细胞总数.

    CellDensity=(N/4)x104cells/mL

    (*)对于计数前经过稀释的细胞悬液,要将上式计算所得的细胞密度乘以稀释倍数。

    注意:

    (1)为了将误差最小化,四个计数室中的细胞均应被计数.只计数一个细胞室会增加误差的机会,要取得更加正确的数值可以将细胞加在两个细胞入口,并取两个N值的平均值。

    (2)(边界线细胞计数规则)细胞计数室上的方格边线上,细网格线上的细胞应该计数,粗网格线上的细胞则不要计入,例如细胞计数室A。

    (3)为了提高计算细胞存活率,操作者应该在染色后20分钟内完成计数(对于对染色液敏感的细胞应在5分钟内完成)。细胞在染色液中时间过长会增加死细胞的数量。

    (4)气泡在细胞计数室中偶尔会出现,如果加样后细胞在计数室中停留时间过长,就有可能出现气泡干扰计数结果。

    (5)细胞计数室具有经过预处理的表面,操作者不能重复使用计数板,因为在一次使用后计数室表面特性改变,重复用后会带来不正确的计数结果。

    (6)为了储存没有用过的计数板,操作者应将其放入密封的保险袋中,不要将用过的塑料板装进原来的塑料袋中。

    (7)在室温下保存,高温会改变计数室表面的特性。

    (8)实验室专用,非临床,治疗,诊断用途。

 

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